三、维 生 素
一、甜菜碱盐酸盐
1、原理，采用非水滴定法，用乙酸汞将甜菜碱盐酸盐转化为乙酸盐和难电离的氯化汞，在乙酸介质中用高氯酸滴定溶液对生成的乙酸盐进行滴定。
2、试剂，①冰乙酸；②乙酸汞溶液，将50g乙酸汞研细，加1000ml冰乙酸溶解，置棕色瓶中，密闭保存。③结晶紫指示剂；2g/L，取2g结晶紫，加100ml冰乙酸；④高氯酸标准滴定液，0.1mol/L的溶液。
3、测定
取试样预先在105℃烘箱中干燥至恒重，称取干燥试样0.4g（精确到0.0002g），加50ml冰乙酸加热溶解，加25ml乙酸汞溶液，冷却，加结晶紫指示剂2滴，用0.1mol/L的高氯酸标准溶液滴定到溶液呈绿色，同时作空白试验。
X%= （V-V0）×C×0.01536 x m×100
C----高氯酸标准溶液的浓度mol/L
V---试验组消耗高氯酸标准溶液的体积ml
V0---空白组消耗高氯酸标准溶液的体积ml
m---试样质量。
二、氯化胆碱
称取经105℃干燥至恒重的试样1g（精确到0.0002g），置于100ml容量瓶中，加水70ml混匀，在约80℃水浴上加热15min，取出，在电动振荡器振荡20min，用水定容至100ml，过滤，吸取10ml滤液于100ml高型烧杯中，在冰箱内冷却到5℃以下，加10ml雷氏盐溶液（2%），不时搅拌反应30min（再令沉淀静置陈化15min），然后将沉淀定量到转移到事先在105℃烘干至恒重的玻璃砂芯坩埚中，减压抽滤，在用水洗涤沉淀3-4次，每次10ml，将装有沉淀的坩埚滤器放入烘箱，105℃烘2h称重。
氯化胆碱%= 沉淀重×3.3045 样品重量×100%
雷氏盐甲醇溶液（2%）：2g雷氏盐，溶于100ml甲醇中，放置于低温下保存。
胺盐定性分析：称取3-4g试样，煮50ml水至70-80℃，在加样品，摇匀充分溶解，过滤于150ml三角瓶中，加入1ml浓硫酸，摇匀，将滤液煮沸，用氨制硝酸盐试剂沾滤纸测其气，观察试纸颜色是否发黑，继续煮1-2min，从电炉上取下放冷，加40%氢氧化钠5ml再煮沸，用PH湿润试纸测其蒸气的PH值，PH在7-8为合格。
氨制硝酸银溶液：取硝酸银1g，加水20ml，滴加氨试剂（取浓氨水400ml，加水至1000ml），边加边搅拌，至棕色沉淀将近全溶，过滤，置于棕色瓶中，在暗处保存。
（二）仲裁法（非水滴定法）：
原理：采用非水滴定法，用乙酸汞将氯化胆碱转化成乙酸盐和难电离的氯化汞，在乙酸介质中，以高氯酸对生成的乙酸盐进行滴定。
试剂：5%乙酸汞溶液、50g/L（称取5g乙酸汞研细，用微热的冰乙酸溶解并稀释至100ml，在棕色瓶中密封保存；0.2%结晶紫、2g/L（称取0.2g，加100ml冰乙酸）
测定步骤：称取试样0.3g（精确到0.0002g）置于100ml锥形瓶中，加20ml冰乙酸，2ml乙酸酐，10ml乙酸汞溶液和2滴结晶紫指示剂，摇匀，用高氯酸标准溶液滴定至溶液呈纯蓝色。即为终点。同时做空白试验。
X%= C×（V1-V0）×139.63 x m×1000 ×100
C-----高氯酸标准溶液的浓度，mol/L；
V1----试验组消耗高氯酸溶液的体积，ml；
V0----空白组消耗高氯酸溶液的体积，ml；
m----样品的质量，g。
139.63-----氯化胆碱的分子量。
三、维生素B6
称0.15g样品（精确到0.0002g），加冰乙酸20ml，乙酸汞溶液5ml，温热溶解，放冷，加结晶紫指示剂1滴，用高氯酸标准溶液滴定至溶液呈蓝绿色，同时做空白校正。
VitB6%= （V-V0）×F×0.02056 x m×100
V----样品溶液耗高氯酸标准溶液的体积，ml；
V0----空白溶液耗高氯酸标准溶液的体积，ml；
F-----高氯酸标准溶液浓度，mol/L；
m-----样品重，g。
本法适用于化学合成制得的vitB6。
四、维生素B2（核黄素）
避光操作，称取0.075g（精确到0.0002g），置于烧杯中，加冰乙酸1ml和水75ml，加热溶解后，加水稀释放冷，移置500ml容量瓶中，用水定容。摇匀，吸取10ml于100ml容量瓶中，加1.4%乙酸钠溶液7ml。并用水定容，同时做空白试验作对照。以444nm波长测吸光度。
VitB2%= A x 323×L×C×100= 50A x 323m×100%
A-----样品吸光度；
323----维生素B2的系数；
L----光路长度1cm；
C-----100ml溶液中样品的g数。
五、维生素C（包被）
称取0.2g于250ml三角瓶中，加水100ml（煮沸，冷却），10ml冰乙酸，1ml1%淀粉指示剂，用0.1mol/L碘标准溶液滴定至溶液为蓝色。
VitC%= V×F×0.00886 x m×100
V-----消耗碘标准溶液的体积，ml；
m----试样质量，g；
F---浓度校正系数（碘标液/样品液浓度）碘标准溶液的浓度，mol/L。 |
